服务介绍:
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
HKF0046 | 类器官培养服务费 | 个 | 15000元 |
类器官收集固定流程及注意事项
1.取6孔板中生长好的类器官,每孔200个左右类器官(可以用6、12、24孔板等培养类器官,培养完成以后将同种处理的类器官合并收集,每种处理的类器官总数目不少于200个)。
注意:不要让类器官过度生长,形态小的类器官,才能更好地维持类器官的形状。
2.移液器吸除培养基,用常温的PBS 清洗一遍。
3.加入2mL冷PBSB (1×PBS+0.1%BSA) 轻轻吹打基质胶使基质胶尽可能融化。
注意:此过程在冰上进行,基质胶在低温环境中会融化。
4.剪去1mL吸头顶端使吸口变大,用移液器轻轻将重悬在冷PBSB中的类器官转移至15ml离心管中,冰上操作。
5.等基质胶完全融化后放入垂直离心机中1000rpm/min离心3min,去上清。
6.加入2ml固定液重悬,常温固定30min。
7.放入垂直离心机中1000rpm/min离心3min,去上清,可见类器官沉淀有绿豆大小。加入1.5mL无菌PBS将类器官轻轻重悬转移至1.5mL离心管。
8.用缓冲气袋包裹离心管,保存运输过程中轻拿轻放。