革兰氏染色
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  • 价格¥25
  • 单位
  • 货号HKF3029
  • 品牌浩克

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【产品信息】

产品名称产品货号规格价格
革兰氏染色HKF302925元
一、 实验原理
革兰氏染色法是微生物学中广泛使用的一种鉴别染色法,可用来区分革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-),基本原理是基于细菌细胞壁化学组分不同。细菌经结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成不溶于水的结晶紫-碘复合物。革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚,不含类脂,富含肽聚糖并交联形成致密网格结构,在用乙醇处理时肽聚糖网孔收缩,能将结晶紫-碘复合物阻留在细胞壁内,使其呈现结晶紫的紫色。而革兰氏阴性细菌因其细胞壁薄,肽聚糖含量低且交联松散。遇乙醇时富含类脂的外膜溶解,在细胞壁上出现较大缝隙,结晶紫-碘复合物流出,因此经乙醇脱色后细胞又成无色。此时再经番红复染,革兰氏阴性细菌将被染成红色。
  • 实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。

2、革兰氏染色:切片滴加革兰氏染液A滴染10s-30s,水洗,甩干;滴加革兰氏染液B1min,水洗,甩干;巴氏吸管吸取革兰氏染液C从载玻片磨砂面一端冲洗组织进行分化,至切片流下的革兰氏染液C呈无色即可,水洗,甩干;将切片浸革兰氏染液D溶液1s水洗,镜检,烤箱烤干。

3、脱水:将烤干的切片快速入三缸无水乙醇快速脱水,依次1s、3s、5s。

4、透明封片:切片放入干净的二甲苯5min透明,中性树胶封片。

5、显微镜镜检,图像采集分析。

  • 结果判读:

革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈红色。

注意事项:

1、染色过程中的革兰氏染液C分化是关键步骤,需注意分化程度。

2、尽量不要重复染色,分化液在脱去片子颜色的同时也改变了细胞壁的通透性,影响了最后结果的准确性。

3、冬季气温较低时,染色时间可适当延长。

暂无

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