标本要求：组织、细胞、

　　实验周期：1-2周

　　收费价格：每个样品每个基因250元，每个基因2对引物费2*70元

　　产品介绍：亚硫酸氢盐处理后测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法是检测基因甲基化的经典方法,其原理为:用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞密啶(c)被转化为尿密啶(U)而甲基化的胞嘧啶则不变。据此设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段,则说明该位点存在甲基化反之,说明被检测的位点不存在甲基化。若两队引物均能得到阳性PCR产物,则说明该片段部分甲基化。

　　实验流程：

　　(1) 样本接收:组织、细胞、血液、其它

　　(2) 实验步骤: DNA提取-亚硫酸氢盐处理-纯化DNA-PCR扩增-电泳

　　(3)实验结果:完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)

　　注意事项:

　　1、组织样品:新鲜组织放入液氮或-80度保存,组织不少于100mg,

　　2、培养细胞:通过细胞计数取不少于2×10⁶个细胞于EP管,收集细胞沉淀后,液氮速冻,低温保存或运输(-80℃,避免反复冻融);

　　3、血液标本:以抗凝管保存血样(-4℃保存3~5天,如果要长时间保存需放在-80℃);

　　4、DNA样品需标明浓度和纯度(体积≥50u,浓度≥ 50 ng/ul);

　　5、样本运输:可选择以下任何一种方式高送标本

　　　a组织样本、细胞样本以干冰运输;

　　　b.细胞样本也可直接寄送培养瓶(密封保证不污染、培养液不漏出);

　　6、提供详细的基因信息, MSP方法的扩增序列在140bp左右。我们会根据客户的基因序列信息设计引物,并在方案实验过程中随时与客户沟通。