CD45兔单克隆抗体
996Applications Product Information Immunogen Information Background FC, IHC, IP, WB,ELISA human colon tissue, mouse lung tissue, huma...
查看全文【产品信息】
产品名称 | 产品货号 | 规格 | 有效期 |
Trans RNA 转染试剂 | HKR062 | 0.5mL | 一年 |
Trans RNA 转染试剂(下文简称“Trans ”)采用新型脂质体纳米材料,可用来转染 siRNA、miRNA 等 150bp 以内的小分子 RNA 和 DNA,转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞,如一般细胞株、肿瘤细胞株等。
本产品是一类快捷高效即用型试剂溶液,仅需在 EP 管中将细胞培液与 siRNA 或 miRNA等转染目的小 RNA 同转染试剂混合,室温孵育约 2 min 后加入完全细胞培养液中即可,血清对转染效果没有影响,实验过程无需刻意添加或更换培养液。
【储存与运输】
蓝冰运输, 4℃保存,有效期一年。
使用方法(以 24 孔板为例,其他培养皿中转染请参考表 1)
1.接种细胞
对于贴壁细胞,转染前 18-24 h 进行铺板,本转染试剂要求细胞铺板密度不高,建议 70%-90%为佳。
【注】:培养液中的血清不影响转染效率。转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。
2.准备 Trans-转染目的小 RNA(siRNA 或 miRNA 等)复合物
(1) 对于每孔细胞, 将 20 pmol 待转染目的小 RNA(siRNA 或 miRNA 等)稀释到 50 μL 基础培养基或完全培养基中(无需额外的 Opti-MEM 培养基),混匀。
(2) 对于每孔细胞,将 1.25-2.5 μL(视细胞类型调整) Trans 转染试剂添加到上述步骤(1)中的混合培液中,轻轻混匀。
(3) 室温孵育约 2 min。
3.转染细胞
(1) 将上述孵育完成的转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿或轻微振荡,让转染复合物分散均匀。
(2) 在 37℃,5% CO2 培养箱培养 24-48 h,无需更换新的培养液,之后即可对转入基因表达分析。
【注意事项】
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 小 RNA(siRNA 或 miRNA 等)质量:请务必使用高纯度无内毒素转染级 RNA。
3. 细胞条件:使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保细胞没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。
4. 细胞培养液要求: Trans 细胞转染试剂可用于有血清培养基的转染,并且转染前后不需要换培养基。
确保细胞培养液没有被细菌、真菌或支原体污染。
5. 试剂用量的优化:RNA 浓度和转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,初次使用应优化 RNA 浓 度和转染试剂量以得到最大的转染效率。使用者可尝试每 20 pmol RNA 使用 1~4 μL 体积 Trans 细胞转染试剂进行优化。
表 1:不同培养体积对应的待转 RNA、 Trans、稀释液用量
培养器皿 | 培养液体积(mL) | RNA 量(pmol) | Trans(μL) | 稀释液(μL) |
48 孔板 | 0.3 | 10 | 0.625-1.25 | 25 |
24 孔板 | 0.5 | 20 | 1.25-2.5 | 50 |
12 孔板 | 1 | 40 | 2.5-5 | 100 |
6 孔板 | 2 | 80 | 5-10 | 200 |
35 mm 培养皿 | 3.5 | 140 | 8.75-17.5 | 250 |
60 mm 培养皿 | 6 | 240 | 15-30 | 300 |
100 mm 培养皿 | 10 | 400 | 25-50 | 400 |
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查看全文Tested Applications: IHC, WB,ELISA Cited Applications: WB Species Specificity: Human, Mouse, Rat Cited ...
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