项目介绍
流式细胞术是运用流式细胞仪对细胞或颗粒进行光谱鉴定、细胞分选、计数,广泛用于分析细胞表面和细胞内分子的表达水平、鉴定样品中细胞群的不同细胞类型、评估各细胞亚群的纯度以及分析细胞大小和内含颗粒。主要利用荧光标记的抗体检测蛋白水平,或结合了特定细胞分子的荧光染料,如PI与 DNA 的结合。
应用
常用于细胞表面分子如表面标记物的鉴定及水平分析,以鉴定、定性或定量特定类群的细胞,可以检测细胞内蛋白表达水平,可以利用特定染料分析细胞周期、细胞凋亡,利用线粒体电位染料分析线粒体膜电位,利用DHE等染料检测细胞内ROS水平。
流式细胞仪通道
流式细胞仪Beckman Coulter CytoFLEX;光学参数:FSC(前散射)、SSC(侧散射)、4色荧光通道;数据采集软件:CytExpert。
激发波长 | 通道 | 发射波长 | 常见染料 |
488 nm | FL1 | 525±20 nm | FITC、EGFP、CFSE、AlexaFluor 488 |
FL2 | 585±21 nm | PE、PI、DsRed | |
FL3 | 690±25 nm | PerCP-Cy5.5、PC5 | |
638 nm | 660±10 nm | APC、Alexa Fluor 647 |
结果展示
细胞周期
细胞凋亡
ROS检测
JC-1线粒体膜电位
样品保存运输
1、流式样本接收注意事项
1.1 细胞凋亡
需要活细胞(外地样本不接)。如果细胞带荧光,一定要在交接单和培养板上备注,否则按照无荧光处理。如果因此导致检测结果不可用及样本浪费,我方概不负责,也不接受退单。
1.2 细胞周期
周期需要细胞量比较多,6 孔板送样要求汇合度在70%,但不能超过90%。外地样品,需用预冷的70% 乙醇固定过夜后,加2ml PBS,封口膜封好,4℃运输寄到实验室。如果运输时间较短(2 天内可到),可直接加70% 乙醇后寄过来。
1.3 流式JC-1
需要活细胞(外地样本不接)。细胞汇合度高于70%(6 孔板),多提供2 个空白孔,做阴性和阳性对照。如果细胞带红光或绿光,不能检测。
1.4 流式ROS
需要活细胞(外地样本不接)。细胞汇合度高于70%(6 孔板),多提供2 个空白孔,做阴性和阳性对照。如果细胞带绿光,不能检测。
1.5 细胞表抗
提前确定公司是否有相应流式抗体(组化抗体不可用),其他抗体需要客户自己提供(外地样本不接)。
1.6 流式三标
提前告知样本具体数量和类型(血液或脾脏~)。血样用抗凝管收集(胞内染色至少需要1.5 ml,表抗需要约1 ml),注意防止凝血,4℃保存运输。血样4℃保存最多只能存放一周,时间越久实验结果越差。取血后,需尽快寄到实验室;取脾脏时尽量将动物带到实验室,直接在实验室取材后开始实验,若不能将动物带到实验室,取材(整个脾脏)后将组织放在含有PBS 的EP 管或离心管中,4℃保存,提细胞必须在取材后6 小时以内完成,注意有些检测指标(Treg,TH1, TH2 等)需无菌提取。外地样本不接。
价格
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
GC1021 | 流式 -JC-1( 培养细胞) | 个 | 80 |
GC1022 | 流式 -ROS(培养细胞) | 个 | 80 |
GC1024 | PI 染色 | 张 | 45 |
GC1025 | ROS 活性氧检查 | 样 | 45 |
GC1026 | 流式周期 | 样 | 45 |
GC1027 | 流式凋亡 | 样 | 75 |
GC1028 | 流式表抗 – 单标 | 样 | 45 |
GC1029 | 流式表抗 – 双标 | 样 | 75 |
GC1030 | 流式表抗 – 三标 | 样 | 105 |
您好!请登录